17141,iNtRON,LPS Extraction Kit,脂多糖提取試劑盒
LPS (Lipopolysaccharide) Extraction Kit
CAT. 17141 (100 rxn.)
試劑盒組成
| 組分 | 名稱 | 規格 | 保存方法 |
| 1 | | 1x 100 ml | |
| 2 | | 1x 80ml | 2~8℃ |
LPS背景描述：
◆ 脂多糖（
LPS）是革蘭氏陰性菌細胞壁外膜的主要成分，結構很復雜、熱穩定性極高（在250℃下干熱**
2h才完全滅活）。受LPS發現的歷史原因，如今LPS的概念幾乎等同于內**（endotoxin）。LPS由多糖鏈和脂質A組成，不同**間的多糖鏈是高度變化的，決定**的血清型；而脂質A主要影響LPS的毒性作用。LPS可以引起**刺激的級聯反應和機體的毒性病理生理活動，包括釋放內**引起感染性休克從而導致末梢血管虛脫。臨床常通過檢測LPS的存在來診斷腦膜炎。
◆ 正是LPS與機體**機能的密切關系，生命科學研究常常提取LPS進行相關的研究，如闡明LPS的結構，代謝，**學，生理學，毒性，生物合成途徑；誘導生長促進因子如白介素的合成與分泌；誘導**研究的動物模型如炎癥反應，急性肺損傷，
產品描述：
◆ *常用的LPS提取方法仍然是Westphal,O. (1965)使用的
熱酚-水法（hot phenol-water method），主要優勢在于高產量，但是提取步驟繁瑣，費時，以及常受蛋白質和核酸的污染，純度低等缺點也常困擾科研工作者。
◆ iNtRON提供的LPS提取試劑盒是市場上的**個商品化的產品，排除傳統熱酚-水法的缺陷，使得科研工作者能夠快速方便的從**中提取LPS。
產品優勢：
∷適用性廣，能從所有G
- 菌中提取LPS（見Fig. 2）；
∷操作時間短（包括裂解在內，60min內即可完成）；操作簡單方便；
∷少量**即可獲得足夠的LPS；LPS產量與**培養物成正比，一般使用3~5ml培養物LPS產量*高；***佳培養體積1~2ml（OD600=0.8-1.2）
∷LPS產率高，且重復性好（見Fig.1）；
∷提取LPS下游應用廣，包括直接用于**刺激；
操作步驟：
1）室溫離心收獲**細胞，13，000rpm，30sec。
2）加入1ml裂解緩沖液（Lysis Buffer），劇烈渦旋混勻。
3）加入200μl氯仿，劇烈渦旋混勻10-20 sec，室溫孵育5min。
4）4℃，13,000rpm離心10min，轉移400μl上清到新1.5ml離心管中。
5）加入800μl純化裂解液（Purification Buffer），并混勻。-20℃孵育10min。
6）4℃，13,000rpm離心15min。
7）用1ml 70%EtOH洗滌LPS顆粒，并完全干燥。
8）在LPS中加入70μl Tris-HCL（10mM，pH8.0），并超聲。
應用圖片：
應用文獻：
4） BH.Kim, et al. Effect of retinoids on LPS-induced COX-2 expression and COX-2 associated PGE2 release from mouse peritoneal macrophages and TNF-α release from rat peripheral blood mononuclear cells. Toxicology Letters 150(2):191-201(2004).
6） Chitrita DebRoy, et al. Multiplex Polymerase Chain Reaction Assay for Detection of Nonserotypable Shiga Toxin–Producing Escherichia coli Strains of Serogroup O147. Foodborne Pathogens and Disease 7(11): 1407-1414(2010).
